ፈሳሽ ባዮፕሲዎች ካንሰርን ለመመርመር የደም-ቲትማ ቲሹዎች አይሆኑም
በተለምዶ, ዕጢዎች ቲሹ ባዮፕሲዎችን በመጠቀም ይመረመራሉ. አንድ ትንሽ ናሙና የሚወሰደው ከዕጢታው እና ከጂኖቲፕፕ ጋር የተያያዘ ወይም በጄኔቲክ ሜካፕ ላይ ነው. በዚህ አቀራረብ ላይ ያለው ችግር የሚለመዱትን እብጠቶች ማስወገድ ሊከብዳቸው ይችላል. በተጨማሪም, እብጠቱ ባዮፕሲ የጡቱ ቁራጭ ብቻ ነው.
በ 2015 በመገረም ህክምና መድሃኒት ላይ, በላባባ እና ተባባሪ ደራሲዎች ስለ የተለመደው እብጠ-ህመም ባዮፕሲ የሚከተሉትን በተመለከተ የሚከተለውን አስተያየት ሰጥተዋል-
ለታሳዩ ምክንያቶች, በቅደም ተከተል ባዮፕሲዎች እብነትን መከታተል አስቸጋሪ ነው. በተጨማሪም, ባዮፕሲው እብጠቱን አንድ ቦታ ብቻ የሚያንጸባርቅ እና በአጠቃላይ የጡንቻን ሚዛን (ሚውቴሽን) ሙሉ በሙሉ በትልቁ ትንንሽነት የሚያመለክት አይደለም. አንድ አማራጭ እኩል ዕንቁዎችን ለማርካት ብዙ ባዮፕሲዎችን ማግኘት ይሆናል, ግን ይህ አማራጭ ሊከሰትም ሆነ ትክክለኛ አይደለም.
ፈሳሽ ባዮፕሲ በካንሰር ካንሰር ከሚታከሙ የደም ናሙናዎች የተገኘ የዲ ኤን ኤ (ctDNA) መለዋወጥ እና ሌሎች የተጋለጡ ምርቶች መለዋወጥን ያካትታል. ይህ ፈጣን የመመርመሪያ ዘዴ ፈጣን, ማጋጣጫ, እና ወጪ ቆጣቢ እንደሚሆን ተስፋ ይሰጣል.
የሂንዱ ባዮፕሲ ታሪክ
በ 1948, ማንዴል እና ሜቲስ የተባሉ ሁለት የፈረንሳይ ተመራማሪዎች በቅድሚያ ጤናማ በሆኑ ሰዎች ደም ውስጥ ኤችአይኤንዳንን ለይተው እንደገለጹ ተናግረዋል. ይህ ግኝት ከሱ ጊዜ በፊት ነበር, እስከ አሥርተ ዓመታት ድረስ ደግሞ ሲቲዳማ ተፈልጓሚ ነበር.
በ 1977 ሊና እና ባልደረቦቻቸው በካንሰር በሽተኞች ደም ውስጥ ተጨማሪ የሲቲአይኤን መጠን ተገኝተዋል.
እ.ኤ.አ. በ 1989, Stroun እና ባልደረቦች በደም ውስጥ የነቀርሳ (ኒንፕላስቲክ) ባህርይ (የካንሰር) ባህርያት ለይተውታል. ከእነዚህ ግኝቶች በኋላ ሌሎች በርካታ ቡድኖች በጡን እብጠጣዎች እና ኦክሳይጂንስ, የማይክሮሰታት ኢሰብ አለመረጋጋት እና ዲ ኤን ኤ ሜቲየየሽን የተባሉ ልዩ ልዩ ሚውቴሽኖችን ለይተው በማወቁ በጡንቻዎች ውስጥ እየተሰራጨ መሆኑን አመልክቷል.
ከፋንች ሴሎች ውስጥ የተገኘ ሲ ቲ ዲአን ከደም ውስጥ ይራወጣል ብለን እናውቃለን, የዚህን ዲ ኤን ኤ የመለቀቁ, የመውጫው ፍጥነት እና የዚህን ዲ ኤን ኤ የመለቀቂያ ስልት ግልጽ አይደሉም, በምርምር ወደ ተቃራኒው ውጤት ያመጣሉ. አንዳንድ ጥናቶች እንደሚያመለክቱት በበለጠ አስከፊ የሆኑ እብጠቶች የካንሰር ሴሎች እና የካቲን ሴሎች በብዛት ይገኛሉ. ይሁን እንጂ, አንዳንድ ጥናቶች እንደሚያመለክቱት ሁሉም ሴሎች ctDNA ይለቀቃሉ. ይሁን እንጂ የካንሰር እጢዎች የካቲኖን መጠን በደም ውስጥ እንዲጨምሩ የሚያደርግ ሲሆን ይህም ሲቲኖአን ካንሰር ጥሩ ኬሚካክ እንዲሆን ያደርገዋል.
በደም ውስጥ ከፍተኛ ክፍፍልና በትንሹ በደም ውስጥ ስለሚከማቹ የካንዲኤንኤን ለመለያየት እና ለመተንተን አስቸጋሪ ነው. በሰራምና በፕላዝማ ናሙና መካከል ያለው የቲ.ዲ.ኤን.ኤን ልዩነት አለ. ከደም ፕላዝማ ይልቅ የደም ባዮርጂ የተሻለ የ ctDNA ምንጭ ነው. ኡመተኒ እና ባልደረቦቹ ባደረጉት ጥናት ውስጥ በማጣራቱ ወቅት ዲ ኤን ኤን በማጣራት ምክንያት የዲ ኤን ኤውን የመድሃኒት መጠን በማጣቱ ምክንያት ከቫይረሱ ጋር ሲነፃፀር ዝቅተኛ እንደሆነ ታውቋል.
እንደ ሂዝነር እና ባልደረቦች, የ ctDNA ን የምርመራ አቅምን ለመንካት ሊፈቱ የሚገባቸው የተወሰኑ ጉዳዮች ናቸው.
በመጀመሪያ, የቅድመ-መለኮታዊ አካሄዶች መደበኛ መሆን አለባቸው .... ከፍተኛ ጥራት ያለው የዲ ኤን ኤ ምርትን ማግኘትን የሚያረጋግጥ የማረጋገጫ መንገድ መምረጥ ወሳኝ እና የደም ናሙና እና አሠራር የፕሉቲካዊ ምክንያቶች የዲኤንኤ ውጤትን በእጅጉ ሊቀይሩ እንደሚችሉ ተረጋግጧል. ሁለተኛ, በጣም አስፈላጊ ከሆኑት ጉዳዮች አንፃር የዲጂታል ዘዴዎችን ማስተካከል አለመኖር ነው. የተለያዩ የዲጂታል ዘዴዎች, ... የተለያዩ ውጤቶችን ያመነጫሉ እነዚህ መለኪያዎች ጠቅላላ ወይም ብቻ የሚያድሰው ዲ ኤን ኤ ላይ ያነጣጠሩ ናቸው .... በሶስተኛ ደረጃ, ስለ ዲ.ኤን.ኤን.ዲ.ኤንዳኖቹ አመጣጥ እና ዝርዝር አሰጣጥ የታወቀ ትንበያ እና በብዙ ጥናቶች ውስጥ ctDNA እንዲፈጠር አስተዋጽኦ ሊያደርጉ የሚችሉ ሁኔታዎችን ያስፈራሉ.
የታለሙ እና ያልተጠበቁ አቀራረቦች
በአሁኑ ጊዜ ለ ctDNA የደም ፕላዝማ (ወይም ሴራ) ሲተነተን ሁለት ዋና ዋና መንገዶች አሉ. የመጀመሪያው ዘዴ የታለመ ሲሆን በጡንቻዎች ላይ የተወሰኑ የጄኔቲክ ለውጦችን ይመለከታል. ሁለተኛው አቀራረብ ምንም ትኩረት ያልተደረገለት ሲሆን በካንሰር የሚያንፀባርቀው ctDNA ን ለመፈለግ በጂኖሚ-አቀፍ ትንታኔን ያካትታል. እንደ አማራጭ አዳዲስ ቅደም ተከተል ማዋቀር የበለጠ ወጪ ቆጣቢ, ያልተጨበጠ አካሄድ ጥቅም ላይ ውሏል. ኤሞ ኤምዎች ፕሮቲን ለማስመሰል የተሰራውን የዲ ኤን ኤ ክፍል ናቸው.
በተወሰኑ አቀራረቦች በተወሰነ የታወቁ የጉዞ ዝውውሮች ውስጥ በተወሰነው የታወቀ የጄኔቲክ ሚውቴሽን ይመረታል.
የመንዳት ሚውቴሽን በካንሰሩ ውስጥ ያለውን የካንሰሩን ሕዋሳት የሚያስተዋውቅ ወይም "መንዳት" ላይ የሚያጠነጥን ሚውቴሽን ነው. እነዚህ ሚውቴሽኖች KRAS ወይም EGFR ያካትታሉ.
ባለፉት አመታት በቴክኖሎጂ እድገቶች ምክንያት አነስተኛውን ሲቲዲ.ኤን (genome) ለመተንተን የታለመላቸው ግብ ቀርቦአል. እነዚህ ቴክኖሎጂዎች ኤኤምአርኤም (የማጉላት መሙዋትን የሚውቴሽን ስርዓት) ያካትታሉ. ዲጂታል PCR (dPCR); ቢላዎች, ኤሌክትነዶች, ማጉያ እና ማግኔቲክስ (ውበት); እና ጥልቅ ቅደም ተከተል (CAPP-Seq).
የታቀደው አካሄድ ሊገኝ የሚችል ቴክኖሎጂ እድገቶች ቢኖሩም, የታቀደለት አቀራረብ ጥቂት የኃይለኛነት ደረጃዎችን (ሆስፖቶች) ላይ ለማተኮር እና እንደ ቧንቧ ማገጃ ጂኖችን የመሰሉ ብዙ ሾፌር ሚውቴሽን ያመለክትበታል.
ወደ ፈሳሽ ባዮፕሲ ያልተጠበቁ አተገባበሮች ዋነኛው ጥቅም የሙከራው በተደጋጋሚ በጄኔቲክ ለውጦች ላይ ባለመሆኑ በሁሉም በሽተኞች ሊጠቀሙባቸው ይችላሉ. ተደጋጋሚ የሆኑ የዘር ውርስ በሽታዎች ሁሉንም ካንሰሮችን አይሸፍኑም, እንዲሁም የተወሰኑ የካንሰር ፊርማዎች አይደሉም. ይሁን እንጂ, ይህ አቀራረብ በተለመደው የስነ-ተዋልዶነት ጉድለት ይጎድለዋል እና የታሸጉ ጂኖዎች ትንተናዎች እስካሁን ሊደርሱ አይችሉም.
የአጠቃላይ ጂኖም ቅደም ተከተል ዋጋ በጣም እየጨመረ መጥቷል. በ 2006, አጠቃላይ ዘመናዊው የቅደም ተከተል ዋጋ በ $ 300,000 ዶላር ነበር. እ.ኤ.አ. በ 2017 አንድ ዶሮ በአልሜኖቹ ወደ $ 1,000 (የአሜሪካ ዶላር) ወርዷል.
የሂደቴ ባዮፕሲ ክሊኒካዊ አገልግሎት
ሲቲኖአን ለመጠቀም መጀመሪያ የተደረጉ ጥረቶች በካንሰር ታካሚዎች ወይም በበሽታ በሽታዎች ላይ በሚታተሙ ጤናማ ታካሚዎች ላይ የተደረጉ ንፅፅርዎች ተገኝተዋል. የእነዚህ ጥረቶች ውጤቶች ጥምረቶች ናቸው ጥቂቶች ብቻ ናቸው ካንሰር, ከበሽታ ነጻ የሆነ ሁኔታን, ወይም እንደገና ካላመቱ.
የካንሰሩን ካንሰር ለመመርመር ጥቂት ጊዜ ብቻ ጥቅም ላይ የሚውልበት ምክንያት በተወሰነ መጠን ctDNA ከዕጢ የሚመጣ ነው. ሁሉም ዕጢዎች ተመሳሳይ መጠን ያለው ዲ ኤን ኤ "ያንጠለጠሉ" አይደሉም. በአጠቃላይ በጣም የተራቀቁ ሰፋፊ ዕጢዎች የዱርጂውን የመጀመሪያውን, የተካሄዱት, ዕጢዎች ካላቸው ፈሳሽ ይልቅ የዲኤንኤ (ዲ ኤን ኤ) እንዲተላለፉ ያደርጋል. በተጨማሪም የተለያዩ የጡንቻ ዓይነቶች የተለያዩ የዲ ኤን ኤ መጠን እንዲንሸራተቱ ያደርጋሉ. ከካንሰሩ የተገኘ የዲ ኤን ኤ ክፋይ ክፍል በመመርመር እና የካንሰር ዓይነቶች ከ 0.01% ወደ 93% በስፋት ይለያል. በአጠቃላይ ሲታይ ጥቂት የቲ ቲ ኤን ኤዎች ከዕጢው የሚመነጩ ሲሆን ቀሪዎቹ ከተለመዱ ቲሹዎች የሚመጡ ናቸው.
ዲ ኤን ኤ መሰብሰብ በሽታ ለመድኃኒትነት ሊውል ይችላል. ዲ ኤን ኤን መሰራጨት በጊዜ ሂደት የካንሰር ለውጥን ለመከታተል ሊያገለግል ይችላል. ለምሳሌ, አንድ ጥናት እንደሚያመለክተው ኮሎሬክታል ካንሰር በሚባለው ታካሚዎች ለሁለት አመት የመቆየት እድል (ማለትም, በኮሎሬክታል ካንሰር ምርመራ ከተደረገ በኋላ ቢያንስ ከሁለት ዓመት በኋላ በሕይወት ያሉ ሕመምተኞች) እና የ KRAS ሆትፖት ሚውቴሽን ከ 100 በመቶ በላይ ተጓዳኝ ዲ ኤን ኤ. በተጨማሪም በቅርብ ጊዜ ውስጥ አደገኛ ዲ ኤን ኤ የመርከሱ ቆዳዎችን ለመቆጣጠር ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል.
ዲ ኤን ኤን መሰራጨት ለፈውስ ምላሽ ምላሽ ለመቆጣጠር ጥቅም ላይ ሊውል ይችላል. የዲ ኤን ኤ ማሰራጨቱ ዕጢዎች በጂን ቅንጣቶች የተሻሉ ስለሆኑ ይህ ዲ ኤን ኤ ዲ ኤን ኤ (ዲ ኤን ኤ) የያዘ ሊሆን ይችላል; ይህም ዲ ኤን ኤ ከመጠን ባለፈ የእንቁል ዲ ኤን ኤ ምርመራ ከማድረግ ይልቅ ሊያመለክት ይችላል.
አሁን, የወዲያውኑ ተባይ ባዮፕሲን አንዳንድ ምሳሌዎችን እንመልከታቸው.
Guardant360
ሞግዚት ሄልዝ የሚባለውን የዲኤንኤ (ዲ ኤን ኤ) ለሚተላለፉ እና ለ 73 ካንሰር ጋር የተገናኙ ጂኖችን (ዲ ኤን ኤዎችን) ለሚተላለፉ እና ክሮሞሶም ዳግም ማዛመጃዎችን ለመንከባከብ የሚያገለግል ሙከራ አዘጋጅቷል. አሳዳጊው ሄክሲስ ኦንኮሎጂ በሚባል ፈሳሽ ባዮፕሲ ውስጥ ጥቅም ላይ የዋለ ጥናትን ያወጣል. ጥናቱ ከ 50 ታላላቅ ታካሚዎች 50 ቅጠላቅቀጦች ጋር የደም ናሙናዎችን ተጠቀመ.
ለአብዛኛው ክፍል, በፈሳሽ ባዮፕሲ ባዮፕሲን የተመለከቱትን የጂን መለዋወጦች ጋር ለማጣጣም ከግዜው ባዮፕሲ የምርመራ ውጤት ጋር ይዛመዳል.
በ NIH መሠረት-
Guardant360 እንደ EGFR, BRAF, KRAS እና PIK3CA ካሉ የካንሰር ተዛማች ጂኖች ውስጥ ቀደም ሲል በእንሳት ባዮፕሲዎች ናሙና ውስጥ ከተጠቀሱት ጋር ተመሳሳይነት ያላቸው ተመሳሳይ ወሳኝ ሚውቴሽንስን በተመለከተ ከ 94% ወደ 99% ተዛምዶዎች ጋር ተመሳሳይነት አለው.
ከዚህም በላይ ተመራማሪዎቹ እንደሚከተለው ብለዋል-
በጥናቱ ሁለተኛ ክፍል ላይ ተመራማሪዎቹ ወደ 400 የሚጠጉ ታካሚዎችን ይገመሙ - አብዛኛዎቹ የደም ሕዋስ እና የጡንቻ ሕዋሳት የዲ ኤን ኤ ውጤትን ያገኙት እና የጂኖም ለውጦች ጋር አነጻጽር የነበራቸው ሳንባ ወይም ኮሎሬክታል ካንሰር ነበሩ. ከታች የእሳት ትንተና የተገኙ ጥናቶች ካላቸው ውጤቶች ጋር ሲነፃፀር የጠቅላላው ባዮፕሲ አጠቃላይ ትክክለኛነት 87% ነበር. በ 6 ወራቶች ውስጥ የደም እና የእብጥ ናሙናዎች ሲሰበሰቡ በትክክል በትክክል ወደ 98% አድጓል.
የደም ዲ ኤን ኤ በደም ውስጥ ያለው የመርዝሙ ብዛት አነስተኛ ቢሆንም እንኳ Guardant360 ትክክለኛ ነበር. ብዙውን ጊዜ የመብሸያ ቲሹ ዲ ኤን ኤ በደም ውስጥ ከሚገኘው የዲ ኤን ኤ ውስጥ 0.4 በመቶ ብቻ ነው.
በጠቅላላው, የውኃ ባዮፕሲን በመጠቀም, የ Guardant ተመራማሪዎች በ 67 ከመቶ ሕመምተኞች በሀኪሞች ህክምናውን ሊያስተላልፉ የሚችሉ እብነቶችን መለየት ችለዋቸው ነበር. እነዚህ ታካሚዎች ለኤፍዲኤ ተቀባይነት ላላቸው የሕክምና እና የምርመራ ሕክምናዎች ብቁ ናቸው.
ctDNA እና የሳንባ ካንሰር
በ 2016 ኤፍኤ ዲ ኤም ኤ በሳንባ ካንሰር በሽተኞች ውስጥ በሚተላለፍ ዲ ኤን ኤ ውስጥ ኤኤንጂኤምኤ የተባለ የዲ ኤን ኤ ህዋስ (ኤ ኤን ኤች ኤ) ሚውቴሽን ለማጣራት የሚረዳውን የኩብያ ኤምጂኤም መለዋወጥ ምርመራን ፈቅዷል. ይህ ሙከራ የመጀመሪያው የኤፍዲኤ ፈቃድ ያለው ፈሳሽ ባዮፕሲ ነው እናም ፐሮቴይኒብ (ታርሴቫ), አፍቲንቲብ (የጊልቶሪፍ) እና ጂፕቲኒብብ (ኢሬሳ) የመጀመሪያ መስመር ሕክምና እና ኦሺኢሪቲቲብ (ታሪሳሶ) በመጠቀም እንደ ታይፕ ሁለተኛ መስመር ሕክምና. እነዚህ የታወቁ ቴራፒኮች የካንሰሎችን ሕዋሳት በ EGFR የተደረጉ ልዩነቶችን ያስጠቃሉ .
በጣም ወሳኝ በሆነ ምክንያት, ከፍተኛ ቁጥር ስኬቶች ስለሚያገኙ, የኤፍዲኤ ምርመራ የአካል ጉዳት ካደረሰው ባዮፕሲ ካላቸው ታካሚዎች አንድ የህዋስ ምርመራ ባክቴሪያ እንዲወሰድ ይመክራል.
ctDNA እና የቲቢ ካንሰር ናቸው
በካንሰር የሚሞቱ ሰዎች ቁጥር ባለፉት 20 ዓመታት ውስጥ ጨምሯል. በአሁኑ ጊዜ በዓለም ላይ የካንሰር መሞት ዋነኛ ምክንያት ካንሰር ነው. ጉበትን ወይም ሄፕቲክላይላር (HCC), ካንሰርን ለመመርመር እና ለመተንተን ጥሩ የቦይሳከር ሰው የለም. ዲ ኤን ኤን መሰራጨት ለጉርም ካንሰር ጥሩ ምሳሌ ሊሆን ይችላል.
ከላባ እና ከጋራ ፀኃፊዎች ጋር የተገናኘውን ዲ ኤን ኤ የመብላትን ካንሰር ለመመርመር ስለሚጠቀሙበት ሁኔታ እንመልከት.
50 የ HCC ሕመምተኞችን ጨምሮ በተደጋጋሚ በሚደረገው ጥናት ውስጥ የ RASSF1A, p15, እና p16 ግ Hypermethylation እንደ ቀድሞ የመመርመሪያ መሳሪያዎች ተሰጥቷል. አራት የአስደናቂ መአምድልጂ ጄኔቶች (APC, GSTP1, RASSF1A እና SFRP1) ፊርማ ለይቶ የመጠነስ ትክክለኛነት ተፈትነዋል, ሆኖም የ RASSF1A ሜቴይራይዜሽን እንደ መርገም ባዮአርከር ተደርጎ ሪፖርት ተደርጓል. ተከታታይ ጥናቶች ጥልቅ ሴክቲቭ ቴክኖሎጂዎችን በመጠቀም ኤች.አይ.ሲ.ኤን. ኤች.አይ.ፒ. በሽተኞቻቸው ላይ ተካሂደዋል. የተሳሳቱ የዲ ኤን ኤ ኮፒ ቁጥሮች በሁለቱ የሄፕታይተስ ቢ ኤች.ቪ.ኤስ. ያለደም ተፅእኖዎች ያለ ደም ቀዶ ጥገና በተደረገበት ወቅት በኤች.ሲ.ኦ. ይህ ግኝት በ ctDNA ውስጥ የቅጂ ቁጥር ልዩነት ለቀዳሚ የ HCC ክትትልን ለማጣሪያ መሳሪያነት ለመገምገም በር ከፍቶታል.
አንድ ቃል ከ
ፈሳሽ ባዮፕሲስ ለጂኖም ምርመራ ውጤት አዲስ አተገባበር ነው. በአሁኑ ጊዜ በሞለኪዩላር ፕሮፋይል (አጠቃላይ ሞለኪዩላዊ ቅርጽ) የሚሰጡ አንዳንድ የውኃ ባዮፕሲዎች ለሐኪሞች ከቲሹ ባዮፕሲ የተገኘለትን የዘረመል መረጃ ለማሟላት የሚያስችሉ ናቸው. በተጨማሪም ሕዋስ ባዮፕሲ (ቲሹቢ ባዮፕሲስ) በማይገኝበት የፕላስቲክ ባዮፕሲ ምትክ ጥቅም ላይ ሊውሉ የሚችሉ አንዳንድ ፈሳሽ ባዮፕሲስ አለ.
ብዙ ፈሳሽ ባዮፕሲ ሙከራዎች በአሁኑ ጊዜ በመካሄድ ላይ መሆናቸውን እና ይህ ጣልቃ ገብነት ጥቅም ላይ ለማዋል ተጨማሪ ምርምር መደረግ አለበት.
> ምንጮች:
> የቲሞር የጂኖሚ ለውጦች ለደም ምርመራ በተቃራኒው ለቶም ቢፕዮ (አማራጭ) ይቀርባል. NIH.
> Heitzer E, Ulz P, Geigl JB. ካንሰር ዲ ኤን ኤን ለካንሰር እንደ ኤክሲስ ባዮፕሲ ይሸፍናል. ክሊኒካል ኬሚስትሪ. 2015; 61: 112-123. ቋንቋ: 10.1373 / clinchem.2014.222679
> Lagbaa, J, Villanueva A. በአይን ካንሰር ውስጥ ያለ ፈሳሽ ባዮፕሲ. የመዳረሻ ህክምና. 2015 (እ.አ.አ); 19 (105) 263-73.
> ፈሳሽ ባዮፕሲ: ዲ ኤን ኤ በደም ውስጥ መፈለግ, መከታተል እና የካንሰርን በሽታ መከላከል. NIH.
> Umetani N, et al. በመጋለጡ ወቅት ከፍተኛ መጠን ያለው ነፃ የደም ሕዋስ ዲ ኤን ኤ በፕላዝማ ውስጥ ሳይሆን በተለምዶ ተለዋዋጭ ዲ ኤን ኤ የሚከሰተው ነው. አን ኒ ኤ አስታ ሶይ. 2006; 1075: 299-307.
> Wellstein A በ Pharmacotherapy of Cancer ውስጥ ያሉት አጠቃላይ መመሪያዎች. በ: ብረንተን ኤልኤልል, ሂልል-ዳሰንዳድ, ኖልልማን ኮር. eds. ጎርማን እና ጊልማን: - ፋርማኮሎጂካል ኦፍ ቲዚይቲስቲስ, 13 ኒው ዮርክ, ኒው ዮርክ-McGraw-Hill.